температуре 121
о
С в течение 15 мин. К 95 мл расплавленной основной среды
добавляют 5 мл смеси (1:1) дефибринированной бычьей крови и воды, после
чего её прогревают при температуре 100
о
С в течение 15 мин для разрушения
каталазы крови.
2.
Приготовление гематинового агара. Пропись среды аналогична
прописи основной среды. Вместо крови добавляют гематин в количестве 50
мкг/мл из основного раствора. Его готовят внесением 50 мг гематина в 10 мл
воды очищенной, после чего добавляют 0,1 М раствор натрия гидроксида в
объеме, необходимом для растворения гематина. После этого раствор
прогревают при температуре 100
о
С в течение 15 мин.
3.
Приготовление среды Фелтона. Триптон – 1,0 г; глюкоза – 0,05 г;
калия фосфат однозамещенный – 0,2 г; натрия хлорид – 0,5 г; дрожжевой
экстракт – 0,5 г; агар микробиологический – 1,5 г; вода очищенная – до
объема 100 мл; рН 6,8 – 7,0. Среду стерилизуют, разливают в чашки Петри.
На этой среде исследуется способность бактерий разлагать водорода
пероксид в присутствии незначительных концентраций глюкозы.
2.1.2 Тест на продукцию лецитиназы
Некоторые
патогенные
и
условно-патогенные
штаммы
микроорганизмов могут продуцировать лецитиназу С (лецитовителлазу),
вызывающую деполимеризацию мембран клеток хозяина. Ее наличие
определяют по способности бактерий разрушать лецитин, входящий в состав
желтка куриного яйца.
В пробирку с бульоном, содержащим желток куриного яйца, вносят 1
петлю суточной культуры, выращенной на плотной питательной среде, и
инкубируют при (37 ± 1) °С в течение 24 ч. По истечении срока инкубации
регистрируют наличие беловатой мути и всплывающих хлопьев,
свидетельствующих о продукции микроорганизмом лецитиназы.
Положительный контроль
–
S. aureus
6538-P ATCC;
S. aureus
«Жаев»,
S. aureus
«Виотко».
Отрицательный контроль –
S. epidermidis
14990 ATCC.
Предлагаемый производственный штамм не должен продуцировать
лецитиназу.
Предыдущая < | 2864 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF