Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Предлагаемый производственный штамм не должен обладать

протеазой.

Примечание.

Приготовление агара с казеином. Готовят 2 % раствор казеина на 0,1 М

буферном растворе трис-гидрохлорида (pH 7,0 – 8,0). Раствор подогревают

до температуры (55 ± 0,5) °С и смешивают в равных объемах с раствором 2

% агара Дифко, охлажденного до той же температуры. Полученный

казеиновый агар разливают в чашки Петри с соблюдением условий асептики.

3.3 Тест на продукцию амилазы

О продукции амилазы судят по образованию прозрачных зон гидролиза

крахмала вокруг посевов в картофельном агаре.

Испытуемый штамм засевают штрихом, инкубируют в термостате при

температуре (37±1) °С в течение 24 ч. По окончании инкубирования
выросшую культуру в чашках заливают 5 мл раствора Люголя и в течение 5
мин наблюдают за появлением прозрачных светло-коричневых зон вокруг
посевов.

Примечание

Приготовление картофельного агара. Очищенный от кожуры сырой

картофель промывают, нарезают ломтиками, заливают водой из расчета 130 г

на 1 л воды очищенной, кипятят 30 мин, фильтруют и к фильтрату добавляют

20 г агара микробиологического и 2 г натрия хлорида. Нагревают, помешивая

стеклянной палочкой, до полного расплавления агара, если необходимо,

снова фильтруют, разливают во пробирки по 10 мл, укупоривают ватно-

марлевыми пробками и стерилизуют в автоклаве 30 мин при температуре

110 °С (0,5 атм.) в течение 30 мин.

Готовый картофельный агар разливают по 10 мл в стерильные чашки

Петри.

3.4. Тест на продукцию липазы

О продукции липазы судят по образованию прозрачных зон гидролиза

вокруг посевов в агаре, содержащем твин-20.

Культуру, выращенную на МПБ при температуре (37 ± 1) °С в течение

18–24 ч, высевают штрихом на агаризованную среду с твином-20 и
инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение 24 ч. По истечении срока
инкубации регистрируют появление или отсутствие прозрачных зон
гидролиза вокруг посевов в агаре.