центрифугируют в аналогичных условиях. Надосадочную жидкость удаляют,
осадок растворяют в 0,2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, доводят объем
раствора водой до 1 мл и перемешивают. К 0,5 мл полученного раствора
прибавляют 0,5 мл воды очищенной, перемешивают на вихревой мешалке,
прибавляют 5 мл реактива В, вновь перемешивают на вихревой мешалке и
выдерживают при комнатной температуре в течение 10 мин. Далее анализ
проводят по методу В в соответствии с ОФС «Определение белка» (метод
Лоури, метод В).
Примечания
Испытуемый раствор. 1 мл испытуемого раствора, содержащий от 0,1
до 0,13 мг/мл белка.
Приготовление реактива В указано в ОФС «Определение белка»
(Метод Лоури, метод А).
Приготовление 10 % и 20 % растворов трихлоруксусной кислоты
(ТХУ
)
. Растворы готовят соответствующим разведением 80 % раствора
ТХУ.
Приготовление 80 % раствора (ТХУ). Растворяют 150 г ТХУ в 100 мл
воды очищенной. Титруют 1 мл полученного раствора 1 М раствором
натрия гидроксида, (индикатор фенолфталеин).
Концентрацию ТХУ (Х), выраженную в процентах, рассчитывают по
формуле:
Х =
а
∙
0,1634
∙
100 =
а
∙
16,34,
где:
а
- объем 1М раствора натрия гидроксида, пошедший на
титрование испытуемого раствора, мл;
0,1634 - количество ТХУ, соответствующее 1 мл 1 М раствора
натрия гидроксида, г.
Раствор ТХУ разводят в соответствии с полученными данными до
концентрации 80 %. Титр раствора проверяют не реже 1 раза в мес. При
изменении установленной концентрации раствор готовят заново.
Приготовление фосфорномолибденово-вольфрамового реактива. Перед
использованием 2 N фосфорномолибденово-вольфрамовый реактив
(2 N коммерческий реактив Фолина-Чокальтеу) разводят в 2 раза водой
очищенной или готовят реактив в соответствии с ОФС «Реактивы.
Индикаторы».
Метод III (для сорбированных препаратов с содержанием белка
0,02 - 0,16 мг/мл)
Предыдущая < | 2953 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF