background image

свободном  пространстве  сосуда  создают  инертную  атмосферу  или  вакуум 
(менее  0,2 мм  рт. ст.,  или  26,7 Па),  гидролиз  проводят  в  течение  24 ч  при 
температуре  около  110 °С.  Пары  кислоты  гидролизуют  сухой  образец. 
Возможность  конденсации  кислоты  во  флаконе  с  образцом  должна  быть 
сведена к минимуму. После гидролиза испытуемый образец сушат в вакууме 
для удаления остатков кислоты. 

 
 
 
МЕТОД 2 

Использование 

меркаптоэтансульфоновой 

кислоты 

в 

качестве 

восстанавливающей  кислоты  уменьшает  окисление  триптофана  в  процессе 
гидролиза. 

Гидролизующий  раствор

.  2,5 М  раствор  меркаптоэтансульфоновой 

кислоты. 

Парофазный  гидролиз.  От  1 мкг  до  100 мкг  испытуемого  белка  / 

пептида  сушат  в  ампуле  для  гидролиза.  Ампулу  помещают  в  ампулу 
большего  размера,  содержащую  около  200 мкл  гидролизующего  раствора. 
Вакууммированную  (около  0,05 мм рт. ст.  или  6,7 Па)  ампулу  большего 
размера запаивают. Гидролиз проводят при температуре от 170 °С до 185 °С 
в течение 12,5 мин. После гидролиза ампулу с образцом сушат в вакууме в 
течение 15 мин для удаления остатков кислоты. 
 

МЕТОД 3 

Использование  тиогликолевой  кислоты  в  качестве  восстанавливающей 
кислоты предотвращает окисление триптофана при гидролизе. 

Гидролизующий  раствор

.  7 М  хлороводородная  кислота,  содержащая  1 % 

фенола, 10 % трифторуксусной кислоты и 20 % тиогликолевой кислоты. 

Парофазный  гидролиз

.  От  10 мкг  до  50 мкг  испытуемого  белка  / 

пептида  высушивают  в  ампуле  для  гидролиза.  Ампулу  для  гидролиза 

Предыдущая <  | 685  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF