свободном пространстве сосуда создают инертную атмосферу или вакуум
(менее 0,2 мм рт. ст., или 26,7 Па), гидролиз проводят в течение 24 ч при
температуре около 110 °С. Пары кислоты гидролизуют сухой образец.
Возможность конденсации кислоты во флаконе с образцом должна быть
сведена к минимуму. После гидролиза испытуемый образец сушат в вакууме
для удаления остатков кислоты.
МЕТОД 2
Использование
меркаптоэтансульфоновой
кислоты
в
качестве
восстанавливающей кислоты уменьшает окисление триптофана в процессе
гидролиза.
Гидролизующий раствор
. 2,5 М раствор меркаптоэтансульфоновой
кислоты.
Парофазный гидролиз. От 1 мкг до 100 мкг испытуемого белка /
пептида сушат в ампуле для гидролиза. Ампулу помещают в ампулу
большего размера, содержащую около 200 мкл гидролизующего раствора.
Вакууммированную (около 0,05 мм рт. ст. или 6,7 Па) ампулу большего
размера запаивают. Гидролиз проводят при температуре от 170 °С до 185 °С
в течение 12,5 мин. После гидролиза ампулу с образцом сушат в вакууме в
течение 15 мин для удаления остатков кислоты.
МЕТОД 3
Использование тиогликолевой кислоты в качестве восстанавливающей
кислоты предотвращает окисление триптофана при гидролизе.
Гидролизующий раствор
. 7 М хлороводородная кислота, содержащая 1 %
фенола, 10 % трифторуксусной кислоты и 20 % тиогликолевой кислоты.
Парофазный гидролиз
. От 10 мкг до 50 мкг испытуемого белка /
пептида высушивают в ампуле для гидролиза. Ампулу для гидролиза
Предыдущая < | 685 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF